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上海谷研实业有限公司
GuYan Biotech Co.,Ltd.(Shanghai,China)
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RIN-m5f-GFP荧光标记细胞株
细胞培养基 >> 其它

货号: GOY-N0031
品牌: 谷研
参考价格: 2499
包装: 50T
交货期: 2-3天
产地: 进口、国产
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GOY-N0031-50T50T50T2499
货号:GOY-N0031
品牌:谷研
参考价格:2499
交货期:2-3天
产地:进口、国产
产品别名:RIN-m5f-GFP
产品介绍

实验报告:

一、RIN-m5f-GFP荧光标记细胞株分离与培养:

    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

    6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

产品名称

产品简称

货号

RIN-m5f-GFP荧光标记细胞株

RIN-m5f-GFP

GOY-N0031

特性:

安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1。 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3。 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。

细胞特性:

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定:细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。

注意事项:

1、观察细胞zui好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们。

CBZ-L-赖氨

1-氨基啶

1-氨基啶

2,3-喹喔啉

2,3-喹喔啉

细胞松弛素C

细胞松弛素C

L-生物喋

L-生物喋

1-苄基-3-羟基-1H-吲唑

anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA KitHPLC≥98%4800Cystatin-F,CST7 ELISA kit

soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA KitHPLC≥98%3055Cystatin-B,CSTB/CST6/STFB ELISA kit

enkephalin,ENK ELISA KitHPLC≥98%4485Cystatin-A,CSTA/STF1/STFA ELISA kit

Clusterin,CLU ELISA KitHPLC≥98%19caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA Kit

dynorphin,Dyn ELISA KitHPLC≥98%Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA KitHPLC≥98%Caspase 8,Casp-8 ELISA Kit

Neurokinins B,NKB ELISA KitHPLC≥98%100mLCASP5 ELISA Kit

特性:

安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。

 


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